Ako funguje sekvenovanie Sangerovej DNA?
Ako funguje sekvenovanie Sangerovej DNA?

Video: Ako funguje sekvenovanie Sangerovej DNA?

Video: Ako funguje sekvenovanie Sangerovej DNA?
Video: Sekvenovanie DNA 2024, November
Anonim

Sangerovo sekvenovanie výsledkom je tvorba predĺžovacích produktov rôznych dĺžok ukončených dideoxynukleotidmi na 3 'konci. Produkty predĺženia sa potom oddelia kapilárnou elektroforézou alebo CE. Molekuly sú vstrekované elektrickým prúdom do dlhej sklenenej kapiláry naplnenej gélovým polymérom.

Čo je týmto spôsobom Sangerova metóda sekvenovania DNA?

Sangerovo sekvenovanie , tiež známy ako reťazové ukončenie metóda , je technika pre Sekvenovanie DNA založené na selektívnom začlenení dideoxynukleotidov ukončujúcich reťazec (ddNTP) pomocou DNA polymeráza počas in vitro DNA replikácie. Bol vyvinutý Frederickom Sanger a kolegovia v roku 1977.

Tiež, ako funguje sekvenovanie ukončenia reťazca? Sangerova DNA sekvenovanie je tiež známy ako reťaz - ukončenie metóda sekvenovanie . Výsledkom ddNTP je ukončenie reťazca DNA, pretože ddNTP nemá 3'-OH skupinu potrebnú na tvorbu fosfodiesterovej väzby medzi nukleotidmi. Bez tohto zväzku by reťaz nukleotidov, ktoré sa tvoria, je ukončené.

Jednoducho, prečo robíme sekvencovanie podľa Sangera?

Sangerove sekvenovanie je a metóda z Sekvenovanie DNA založené na selektívnom začlenení dideoxynukleotidov ukončujúcich reťazec DNA polymerázy počas in vitro DNA replikácie. Stále má výhodu oproti krátkemu čítaniu sekvenovanie technológie (ako Illumina), že to môcť vyrábať sekvencia DNA číta> 500 nukleotidov.

Je Sangerovo sekvenovanie presné?

Sangerove sekvenovanie s 99,99% presnosť je „zlatým štandardom“klinického výskumu sekvenovanie . Novšie technológie NGS sa však stávajú bežnými aj v laboratóriách klinického výskumu kvôli ich vyššej priepustnosti a nižším nákladom na vzorku.

Odporúča: