Ako funguje klonovanie Gibson?
Ako funguje klonovanie Gibson?
Anonim

The Klonovanie Gibsona Master Mix pozostáva z troch rôznych enzýmov v jednom pufri. Každý enzým má špecifickú a jedinečnú funkciu pre reakciu: T5 exonukleáza - vytvára jednovláknové DNA 3' previsy spätným žuvaním z DNA 5' konca. Komplementárne fragmenty DNA sa môžu následne navzájom anelovať.

Vzhľadom na to, ako Gibson funguje?

The Gibson Spôsob Assembly® je klonovací postup, ktorý umožňuje klonovanie dvoch alebo viacerých fragmentov bez potreby štiepenia reštrikčnými enzýmami alebo kompatibilných reštrikčných miest. Namiesto toho sú do fragmentov začlenené užívateľom definované prekrývajúce sa konce, aby sa umožnilo bezproblémové spojenie susedných fragmentov.

Podobne, čo je v Gibson Assembly Master Mix? The Gibson Cloning Master Mix pozostáva z troch rôznych enzýmov v jednom pufri. Každý enzým má špecifickú a jedinečnú funkciu pre reakciu: T5 exonukleáza - vytvára jednovláknové DNA 3' previsy spätným žuvaním z DNA 5' konca. Komplementárne fragmenty DNA sa môžu následne navzájom anelovať.

Ako funguje montáž Golden Gate týmto spôsobom?

Zlatá brána klonovanie resp Montáž Golden Gate je metóda molekulárneho klonovania, ktorá umožňuje výskumníkovi súčasne a priamo zostaviť viacero fragmentov DNA do jedného kusu pomocou reštrikčných enzýmov typu II a T4 DNA ligázy. Toto montáž je uskutočnené in vitro.

Ako funguje klonovanie brány?

The Klonovanie GATEWAY Technológia je založená na miestne špecifickom rekombinačnom systéme používanom fágom 1 na integráciu svojej DNA do E. Miesta attL a attR obklopujúce vloženú fágovú DNA sa počas excízie špecificky rekombinujú, aby sa zreformovalo miesto attP vo fágu 1 a stránka attB v E.

Odporúča: