Prečo by sa reštrikčný enzým neredukoval?
Prečo by sa reštrikčný enzým neredukoval?

Video: Prečo by sa reštrikčný enzým neredukoval?

Video: Prečo by sa reštrikčný enzým neredukoval?
Video: Ako Putin vyhlásil vojnu Ukrajine a hrozí Západu (prejav s titulkami) 2024, November
Anonim

Môže existovať niekoľko rôznych dôvodov, prečo práve vy reštrikčný enzým nereže DNA, ako je uvedené v tomto videu. Príprava DNA na štiepenie by mal byť bez kontaminantov, ako je fenol, chloroform, alkohol, EDTA, detergenty alebo nadmerné soli, ktoré môžu interferovať s reštrikčný enzým činnosť.

Prečo v tomto ohľade reštrikčné enzýmy nerežú bakteriálnu DNA?

Baktérie mať reštrikčné enzýmy , tiež nazývaný reštrikčné endonukleázy , ktorý rezať dvojvláknový DNA v konkrétnych bodoch na fragmenty. zaujímavé, reštrikčné enzýmy neštiepia svoje vlastné DNA . Baktérie zabrániť svojim vlastným DNA od sekať o reštrikčný enzým prostredníctvom metylácie obmedzenie stránky.

Možno sa tiež pýtať, kde sa reštrikčné enzýmy štiepia? Reštrikčný enzým Typy Vo všeobecnosti typ I enzýmy rez DNA v miestach vzdialených od rozpoznávacej sekvencie; Typ II rezať DNA v rámci alebo blízko rozpoznávacej sekvencie; Typ III rezať sekvencie blízkeho rozpoznávania DNA; a Typ IV štiepi metylovanú DNA.

Podobne sa kladie otázka, čo sa stane, ak pridáte príliš veľa reštrikčného enzýmu?

Môže sa vyskytnúť neúplné trávenie keď priveľa alebo tiež málo enzým sa používa. The prítomnosť kontaminantov v na vzorka DNA môcť inhibovať enzýmy čo tiež vedie k neúplnému tráveniu. Niektorí reštrikčné enzýmy vyžadujú kofaktory pre plnú aktivitu.

Prečo môj reštrikčný súhrn nefunguje?

Neúplné alebo nie trávenie v dôsledku enzýmovej aktivity blokovanej metyláciou DNA. Ak je váš enzým aktívny a trávi kontrolovať DNA a na reakcia je nastavená pomocou optimálnych podmienok, ale stále vidíte problémy s trávenie , môže to byť preto na enzým je inhibovaný metyláciou na templátovej DNA.

Odporúča: