Obsah:

Ako vložíte gén do plazmidu?
Ako vložíte gén do plazmidu?

Video: Ako vložíte gén do plazmidu?

Video: Ako vložíte gén do plazmidu?
Video: KETEN TOHUMU KREMİ İLE CİLDİNİZ GENÇ KIZ CİLDİ GİBİ GÖRÜNSÜN ! DOĞAL GENLEŞTİRİCİ KREM ! 2024, November
Anonim

Základné kroky sú:

  1. Rozrežte plazmid a "vložiť" do gén . Tento proces sa spolieha na reštrikčné enzýmy (ktoré štiepia DNA) a DNA ligázu (ktorá spája DNA).
  2. Vložiť the plazmid do baktérie.
  3. Vyrásť veľa plazmid -prenášajúce baktérie a použiť ich ako "továrne" na výrobu proteínu.

Tiež, ako môže byť gén vložený do plazmidu GCSE?

to je vložené do plazmidu pomocou ligázových enzýmov. the plazmid ide do bakteriálna bunka. transgénna baktéria sa rozmnožuje, čo má za následok v milióny identických baktérií, ktoré produkujú ľudský inzulín.

Okrem toho, ako subklonujete gén? Základné kroky pre Subklonovanie Uvoľníte a vyčistíte svoj inzert z rodičovského vektora, ligujete tento inzert do pripraveného cieľového vektora, transformujete túto ligačnú reakciu na kompetentné bakteriálne bunky. Potom preskenujete transformované bunky pre vložku.

Ak vezmeme do úvahy toto, aké sú 4 kroky klonovania génov?

V klasickom protokole klonovania štiepenia reštrikčnými enzýmami a ligácie zahŕňa klonovanie akéhokoľvek fragmentu DNA v podstate štyri kroky:

  • izolácia DNA záujmu (alebo cieľovej DNA),
  • podviazanie,
  • transfekcia (alebo transformácia) a.
  • skríningový/výberový postup.

Ako amplifikujete plazmid?

Experimentálny postup

  1. Spustite PCR a purifikujte produkt PCR: Spustite PCR na amplifikáciu inzertnej DNA.
  2. Strávte svoju DNA:
  3. Izolujte svoj inzert a vektor gélovou purifikáciou:
  4. Ligujte svoju vložku do vektora:
  5. Transformácia:
  6. Izolujte hotový plazmid:
  7. Overte svoj plazmid sekvenovaním:

Odporúča: