Môže byť BamHI tepelne inaktivovaný?
Môže byť BamHI tepelne inaktivovaný?

Video: Môže byť BamHI tepelne inaktivovaný?

Video: Môže byť BamHI tepelne inaktivovaný?
Video: AP Biology: Restriction Enzyme Digests on Circular Plasmids 2024, November
Anonim

Hoci NdeI môcť byť tepelne inaktivovaný , BamHI -HF nemôže.

Ako týmto spôsobom deaktivujete BamHI?

Teplo inaktivácia sa uskutočnil nasledovne, aby sa priblížil typický experiment. 50 ul reakčnej zmesi obsahujúcej vhodný NEBuffer, 0,5 ug DNA teľacieho týmusu a 5 alebo 10 ul reštrikčnej endonukleázy (v predajnej koncentrácii) sa inkubovalo pri teplote 37 °C počas 60 minút a potom pri teplote 65 °C alebo 80 °C počas 20 minút.

Podobne, aké je reštrikčné miesto pre BamHI? BamHI . Obmedzenie endonukleáza BamH I viazaná na nešpecifickú DNA. BamH I (z Bacillus amyloliquefaciens) je typ II obmedzenie endonukleáza, ktorá má schopnosť rozpoznať krátke sekvencie (6 b.p.) DNA a špecificky ich štiepiť v cieli stránky.

V tomto ohľade musím reštrikčný enzým inaktivovať teplom?

Inaktivácia z obmedzenie endonukleázy vo všeobecnosti nie je nevyhnutné , ale v niektorých prípadoch môže zvýšiť účinnosť transformácie.

Čo je tepelná inaktivácia?

Teplo - inaktivácia ( kúrenie do 56 °C počas 30 minút). inaktivovať komplement, skupina proteínov prítomných v sére, ktoré sú súčasťou imunitnej odpovede. Teplo sa tiež použil na zničenie mykoplazmy v sére.

Odporúča: